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荧光定量PCR检测技术服务

实时荧光定量 PCR(Quantitative Real-time PCR,qPCR)是通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测实现对起始模板定量或定性的技术。荧光定量 PCR 常用的荧光化学材料有两大类:荧光染料和荧光探针。荧光染料以非特异性的 SYBR Green Ⅰ为主要代表;荧光探针则包括特异性的 Taqman、分子信标、荧光标记引物、杂交探针等几种。目前使用较多的方法是 SYBR Green Ⅰ染料法和 Taqman 探针法。相对定量是通过内参基因 Ct 值与待检基因 Ct 值经过 2^- △△ Ct 法数学运算,得出样本间表达量差异倍数关系。绝对定量则需要制备标准品并建立标准曲线,然后检测待测样本中的基因,比对标准曲线得到基因准确拷贝数。

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